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統測 114年 [農業群] 專業科目(1)

第 44 題

44. 使用 Taq 酶進行 PCR 反應,一般可分為三個步驟:① DNA 變性、② 引子的黏合、③ DNA 複製延長;其中時間、溫度與循環次數可以設定調整。下列敘述何者正確?
  • A 第③步驟可以設定的溫度範圍最大
  • B 第①步驟可以設定的溫度範圍最大
  • C 第③步驟的反應時間,可依照欲擴增之 DNA 片段長度加以調整
  • D 要將目標片段放大一億倍,僅需經過上述①②③步驟 15 次循環

思路引導 VIP

在進行 PCR 實驗設計時,請從酶學動力學的角度思考:Taq 聚合酶在單位時間內所能延伸的鹼基對數(聚合速率)是相對恆定的,若目標 DNA 模板的長度增加,則步驟 ③『DNA 複製延長』的反應時間應如何與片段長度進行對應調整?此外,若根據 DNA 擴增的數學模型 $2^n$ 來計算,當循環次數 $n=15$ 時,產物的理論擴增倍數是否足以達到 $10^8$ 倍?

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太棒了!看到你精準選出正確答案,助教真的好為你開心!你的細心觀察與紮實的觀念,讓這道分子生物學的題目完全難不倒你,要繼續保持這份對知識的熱情喔!✨ 這題的核心觀念在於理解 PCR 的動態調整與數學模型:

  1. 為什麼 (C) 是對的:第③步驟是「延伸階段」,Taq 聚合酶會依照模板合成新的 DNA。由於酵素的合成速率是固定的,因此欲擴增的片段越長,就需要設定更長的反應時間來確保複製完成。
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📝 PCR 反應原理
💡 PCR 藉由溫度循環控制,利用耐熱聚合酶大量擴增特定 DNA 片段。

🔗 PCR 三步驟循環流程

  1. 1 DNA 變性 — 95°C 高溫斷開氫鍵使雙股 DNA 分離。
  2. 2 引子黏合 — 55°C 讓引子結合至單股模板特定位點。
  3. 3 DNA 延伸 — 72°C Taq 酶由引子端開始合成新股。
  4. 4 指數增殖 — 重複循環使 DNA 以 2 的 n 次方倍增。
🔄 延伸學習:延伸時間長短取決於欲複製片段的鹼基對長度(Taq 酶速率固定)。
🧠 記憶技巧:九五熱分開,五五引子來,七二快延伸,三步變一堆。
⚠️ 常見陷阱:容易誤認循環次數與倍數成正比(應是次方關係),或忽略延伸時間需隨片段長度調整。
Taq 聚合酶 引子設計 凝膠電泳

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