調查局三等申論題
114年
[醫學鑑識組] 生物化學
第 一 題
說明二種可以測定蛋白質濃度的方法，以及二種可以決定蛋白質分子量的方法。（8 分）說明有那些方法可以決定蛋白質的一級、二級、三級、四級結構。（12 分）
📝 此題為申論題
思路引導 VIP
本題主要考查蛋白質生化分析技術的基礎知識。解題時應將問題拆解為「濃度」、「分子量」及「四個層級結構」三大區塊，並針對每一項列舉具代表性的實驗方法，務必寫出中文名稱並附上英文專有名詞（如 Bradford assay、X-ray crystallography），同時簡要說明其核心原理，以展現專業度並切中給分要點。
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【破題】蛋白質的理化性質與結構層次複雜，需藉由不同的生化及儀器分析技術，利用呈色反應、電場移動速率、光譜吸收或射線繞射等原理，方能精確測定其濃度、分子量及各級空間結構。 【論述】 一、蛋白質濃度與分子量之測定方法（8 分）
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蛋白質分析與結構鑑定
💡 理解蛋白質濃度、分子量及一至四級空間結構之物理化學分析原理與鑑定技術。
- 濃度與分子量：Bradford 法利用染劑結合顯色，BCA 法利用銅離子還原；SDS-PAGE 利用負電荷均勻化依大小分離，質譜儀（MS）提供精確分子量。
- 一、二級結構：Edman 降解法逐一標記 N-端鑑定序列；圓二色光譜（CD）偵測 α-螺旋與 β-摺疊之特徵吸收峰以定量比例。
- 三、四級結構：X-ray 晶體學與 NMR 解析原子級 3D 結構；冷凍電鏡（Cryo-EM）則為解析巨大蛋白質複合體四級結構之利器。
