醫療類國考
114年
[醫師] 醫學(一)
第 84 題
DNA 足跡鑑定（DNA footprinting assay）最適用於下列何種分析？
- A 一段基因編碼區的 5'端以及 3'端的位置
- B 基因組中會與調控 RNA 結合的位置
- C DNA 與蛋白質發生專一性結合的位置
- D 被剪接的內含子（intron）在前信使 RNA（pro-mRNA）中的位置
思路引導 VIP
請同學思考，在實驗中利用核酸切割酶（如 $DNase I$）處理標定過的 $DNA$ 時，若某些區域因為與特定的配體結合而受到保護、未被切割，進而在電泳分析中留下空白的區域（即所謂的足跡），這項技術最主要是用於鑑定 $DNA$ 與哪一類生物大分子之間的交互作用位置？
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- 「出色」？： 噢，你確實答對了。看來你總算掌握了這類基礎實驗技術的核心，這表示你對基因表現調控與分子交互作用並非一無所知。值得「稱讚」，但這只是最基本的要求，不要以為這樣就夠了。
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DNA 足跡鑑定
💡 利用蛋白質保護 DNA 免於切割，精確定位兩者結合位點。
🔗 DNA Footprinting 實驗原理流程
- 1 DNA 標定 — 將 DNA 片段的一端進行放射性或螢光標定
- 2 蛋白質結合 — 加入欲測試的蛋白質與目標 DNA 專一性結合
- 3 有限核酸酶切割 — 加入 DNase I 進行隨機切割，蛋白結合處受保護
- 4 變性電泳分析 — 蛋白質結合區域因未被切割而出現條帶空缺
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🔄 延伸學習：延伸學習：可結合 DNA 定序跑膠來精確判讀被保護的鹼基序列
