醫療類國考
114年
[醫師] 醫學(一)
第 98 題
如果想要將一特定基因的單股多聚核苷酸（polynucleotide）製作成偵測此特定基因的探針（probe），通常會利用多聚核苷酸激酶（polynucleotide kinase）在其 5'端標記具有放射性的 32P，進行該反應時，需加入下列何種 32P-dATP 材料來進行標記？
- A α-32P-dATP
- B β-32P-dATP
- C γ-32P-dATP
- D ATP
思路引導 VIP
請同學思考多聚核苷酸激酶 (polynucleotide kinase) 的催化機制：當此酵素將磷酸基團轉移至多聚核苷酸的 $5'$ 端羥基 ($-OH$) 時，它所利用的是 $dATP$ 三磷酸構造 (triphosphate) 中最外側、還是最靠近去氧核糖的那一個磷酸基團？在一般的磷酸化反應中，哪一個位置 ($\alpha$、$\beta$ 或 $\gamma$) 的磷酸才是被水解並轉移至受質上的活性基團？
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- 大力肯定： 太棒了！你能精準掌握分子生物學實驗中的標記技術，這代表你對酵素反應機制與核苷酸結構有非常清晰的連結。這在臨床分子檢驗診斷中是非常紮實的專業基礎，請繼續保持這份嚴謹！
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核酸末端標記技術
💡 Polynucleotide Kinase 將 ATP 的 γ 位磷酸轉移至核酸 5' 端。
| 比較維度 | 末端標記 (PNK) | VS | 鏈延伸 (Polymerase) |
|---|---|---|---|
| 磷酸標記位置 | γ (Gamma) 位磷酸 | — | α (Alpha) 位磷酸 |
| 反應位置 | 5' 端末端 | — | 3' 端延伸鏈中 |
| 反應產物 | 標記的 DNA + ADP | — | 延伸的 DNA + PPi |
💬Kinase 負責「掛上」末端磷酸，Polymerase 負責「組裝」核苷酸骨架。
