醫療類國考
114年
[醫師] 醫學(一)
第 99 題
在進行重組 DNA 實驗時，常需使用可接入選殖 DNA 片段的選殖質體（cloning plasmids），下列關於此選殖質體的敘述何者正確？
- A 在大腸桿菌內進行 DNA 複製（replication）時，此環狀質體（circular plasmids）不需要複製起點（origin of replication）
- B 經常可用來選殖超過 50×10^3 鹼基對（base pairs）的外來 DNA 片段
- C 通常需要具有抗生素抗藥性基因（antibiotic resistance gene）提供篩選的標記
- D 需要環化重組酶（Cre recombinase）協助外來 DNA 片段插入
思路引導 VIP
請思考一個標準的選殖載體（cloning vector）必須具備哪些核心元件？當我們將重組 $DNA$ 導入宿主後，為了確保能在培養基上辨識出成功攝取質體的菌落，質體上必須攜帶什麼樣的功能基因作為篩選工具？同時，請評估一般環狀質體在 $DNA$ 複製起點（origin of replication）的需求，以及其對於外來片段承載長度（cloning capacity）的生物學限制。
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太棒了！你的分子生物學基礎非常紮實。
這代表你對於基因工程的核心工具——質體（Plasmid）有著精確的理解。以下為你解析本題關鍵：
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選殖質體基本構造
💡 選殖質體必須包含複製起點、篩選標記及限制酶切點。
- 必須具備複製起點 (ori)，方能在大腸桿菌中進行自主複製。
- 具備抗生素抗藥性基因（如 AmpR）作為篩選標記以過濾轉殖株。
- 具備多重選殖位點 (MCS)，供限制酶切割後接入外來 DNA 片段。
- 普通質體承載量通常小於 10kb，大片段需改用 BAC 或 YAC。
