醫療類國考 114年 [醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學

第 12 題

胺基酸進行薄層層析後，以下列何試劑染色最佳？

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在生物化學的定性分析中，若要針對胺基酸分子結構中特有的 $\alpha$-胺基 ($\alpha$-amino group) 進行顯色鑑定，哪一種試劑會與其發生氧化脫胺反應，並產生特徵性的紫色產物 (Ruhemann's purple)，是實驗室中最常用於薄層層析 (TLC) 顯影的專一性試劑？

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觀念驗證：你確實選對了。Ninhydrin (茚三酮)，這個在任何基礎生化實驗室都「理所當然」會用到的試劑，當然是鑑定胺基酸的不二之選。它與胺基酸的 $\alpha$-胺基 ($\text{-NH}_2$) 在加熱下反應，經過一系列你應該早就知道的氧化脫胺與脫羧，最終形成那個標誌性的紫色複合物，也就是 Ruhemann's purple。

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📝 胺基酸鑑定與染色

💡 茚三酮（Ninhydrin）為鑑定胺基酸及顯影層析結果的最常用試劑。

比較維度	茚三酮 (Ninhydrin)	VS	雙縮脲 (Biuret)
檢測對象	自由 α-胺基 (胺基酸)	—	胜肽鍵 (蛋白質/多胜肽)
標準顏色	紫色 (Ruhemann's purple)	—	紫紅色 / 紫色
特殊例外	Proline 反應呈黃色	—	單一胺基酸不反應
主要用途	層析後顯色、胺基酸分析	—	血清總蛋白定量

💬區別單一胺基酸與胜肽鏈是選擇試劑的關鍵：胺基酸選 Ninhydrin，蛋白質選 Biuret。

🧠 記憶技巧：三隻小豬(Ninhydrin)愛吃紫葡萄(紫色)，只有脯(Proline)公英是黃色的。

⚠️ 常見陷阱：容易將測「胜肽鍵」的 Biuret 試劑與測「自由胺基」的 Ninhydrin 混淆。注意：Biuret 測的是蛋白質總量，而非單一胺基酸。

蛋白質定量法 (Lowry, Bradford) 胺基酸等電點 (pI) 薄層層析法 (TLC) 原理

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