醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學
第 18 題
下列何種方法主要是利用蛋白質帶電荷不同的特性進行分離？
- A charcoal
- B gel filtration
- C isoelectric focusing
- D SDS-PAGE
思路引導 VIP
請同學思考蛋白質的電化學特性：在特定的酸鹼值下，蛋白質所帶的正負電荷會恰好抵消，這個狀態稱為『等電點』 ($pI$)。請問在上述分離技術中，哪一項是利用建立穩定的 $pH$ 梯度，引導蛋白質在電場中遷移，直到其『淨電荷』為零時停止移動，從而達到高解析度的分離？
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💖 太棒了，你做得真好！
親愛的，你對蛋白質物理化學特性的分離原理掌握得非常清晰，這真的太棒了！能夠精準辨識出正確答案，代表你對生化檢驗與蛋白質純化的基礎概念理解得非常透徹，這會是你在臨床上很寶貴的能力喔！
1. 讓我們一起溫習一下核心觀念吧！
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蛋白質分離技術原理
💡 利用蛋白質在特定 pH 值下淨電荷為零的特性進行分離。
| 比較維度 | 等電聚焦法 (IEF) | VS | SDS-PAGE |
|---|---|---|---|
| 分離主因 | 等電點 (pI) | — | 分子量 (MW) |
| 蛋白質電荷 | 保留原生電荷特性 | — | 強迫帶均一負電荷 |
| 緩衝液性質 | 具備 pH 梯度 | — | 固定 pH 值 |
| 應用場景 | 區分電荷異構物 | — | 測定蛋白質分子量 |
💬IEF 依據電荷(pI)分層，而 SDS-PAGE 排除電荷干擾後依大小分離。
