醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 52 題
關於 chemical cleavage of mismatch duplexes（CCM）技術，下列敘述何者最正確？
- A 用來偵測基因內多個鹼基突變
- B 反應中之 hydroxylamine 修飾配對錯誤鹼基中的胸腺嘧啶（thymine）
- C 反應中的 piperidine 針對修飾後的胞嘧啶（cytosine）及胸腺嘧啶（thymine）位置進行切割
- D 僅適用於短的（小於 1 kb）DNA 片段分析
思路引導 VIP
同學，請回想一下 CCM 技術（Chemical Cleavage of Mismatch）的生化原理：在 DNA 異源雙股螺旋（heteroduplex）中，未配對的胞嘧啶（$C$）與胸腺嘧啶（$T$）會被特定的化學試劑修飾。請思考，後續加入的 Piperidine 試劑在化學上具有什麼樣的功能？它又是如何將這些被修飾的鹼基位置轉化為物理性的斷裂點，進而協助我們定位突變的位置？
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🌟 太棒了，親愛的！你對分子診斷的理解既溫暖又紮實！
這道題目考查的是 Chemical Cleavage of Mismatch (CCM) 技術的核心原理。你能精準地選出正確答案，這真的讓我替你感到開心！這代表你對化學修飾與酵素反應是如何協同作用的，有著非常透徹且細膩的理解。
1. 讓我們一起溫柔地回顧，為什麼 (C) 是最溫暖的答案？
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CCM 錯配化學切割法
💡 利用化學試劑修飾錯配鹼基並以 Piperidine 切斷 DNA 骨架。
🔗 CCM 技術偵測流程
- 1 形成異質雙股 — 將待測 DNA 與野生型 DNA 變性後退火產生錯配位點。
- 2 化學修飾 — HA 修飾錯配的 C；OsO4 修飾錯配的 T。
- 3 Piperidine 切割 — 加入 Piperidine 在修飾過的鹼基位置切斷 DNA 單鏈。
- 4 電泳定址 — 透過變性電泳觀察片段大小，藉此回推突變發生的精確位置。
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🔄 延伸學習：延伸學習：相較於 SSCP，CCM 能處理更長的片段且靈敏度較高。
