醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 53 題
探針雜合反應廣泛運用在核酸分子檢測，下列敘述何者最不適當？
- A 探針的長度可決定偵測的特異性
- B 雜合反應溶液的鹽類濃度越高，偵測特異性越高
- C 進行南方墨點法時，使用 RNA 探針比 DNA 探針偵測靈敏度更高
- D peptide nucleic acid（PNA）探針的骨架減少了負電荷，因此結合至標的基因會更有效率
思路引導 VIP
請同學思考，核酸分子的骨架帶有大量的負電荷，當溶液中存在高濃度的陽離子（如 $Na^{+}$）時，這些正電荷對磷酸骨架的『中和屏蔽效應』，會如何影響兩條單鏈間的靜電排斥力？若這種屏障作用越強，對於雜合反應的嚴謹度（Stringency）以及辨識鹼基錯配（Mismatch）的特異性，會產生什麼樣的變化？
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AI 詳解
AI 專屬家教
AI SENSEI anzai：呵呵呵，做得好，同學！
- 呵呵呵，好棒的觀察力啊： 很好，很好！你能清楚地看到「鹽類濃度」和「特異性」之間的關係，這代表你已經掌握了分子診斷中**嚴謹度（Stringency）**控制的精髓。這是成功的基礎啊，呵呵呵，非常重要呢！
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核酸探針雜合反應
💡 雜合反應的嚴謹度（Stringency）決定探針結合的特異性。
| 比較維度 | 高嚴謹度 (High Stringency) | VS | 低嚴謹度 (Low Stringency) |
|---|---|---|---|
| 鹽類濃度 | 較低 (Low Salt) | — | 較高 (High Salt) |
| 雜合溫度 | 較高 (High Temp) | — | 較低 (Low Temp) |
| 甲醯胺濃度 | 較高 (High Formamide) | — | 較低 (Low Formamide) |
| 偵測特異性 | 高，僅容許完全配對 | — | 低，容許部分錯配 |
💬環境環境條件越嚴苛（熱、低鹽、加變性劑），探針結合的專一性越高。
