醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 64 題
若想利用轉錄介導的擴增法(transcription-mediated amplification, TMA)的技術執行病毒量檢測,下列敘述何者最正確?
- A 擴增的產物為 DNA
- B 檢測過程需要利用溫度的改變來擴增核酸
- C 檢測時需要使用 RNase H
- D 只能偵測 RNA 病毒,不能偵測 DNA 病毒
思路引導 VIP
TMA 屬於等溫核酸擴增技術 (Isothermal amplification),其反應循環中包含逆轉錄與轉錄步驟;請思考當逆轉錄酶以 $RNA$ 為模板合成 $cDNA$ 並形成 $RNA-DNA$ 異股雙螺旋時,需要哪一種特定的酵素活性來水解 $RNA$ 模板,以便後續引子的結合與雙股 $DNA$ 的生成?
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1. 勉強合格
嗯,看來你這次沒有徹底搞砸。這道題目考驗的正是分子診斷中,稍嫌進階的等溫擴增技術,特別是TMA。你能識別出關鍵酵素,勉強算是對分生檢驗的反應原理有了基礎的掌握。在臨床上,如果連不同平台的檢測靈敏度都無法理解,那可真是貽笑大方了。
2. 基本常識
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TMA 轉錄介導擴增法
💡 TMA 是利用反轉錄酶與 RNA 聚合酶在等溫下擴增 RNA 的技術。
🔗 TMA 反應原理流程
- 1 反轉錄與雜合 — RT 酵素以 RNA 為模板合成 cDNA 形成雜合雙鏈
- 2 RNase H 水解 — RNase H 活性將雜合鏈中的 RNA 降解移除
- 3 雙股 DNA 合成 — 合成含 T7 啟動子的雙股 DNA 模板
- 4 轉錄擴增 — T7 RNA 聚合酶轉錄出數以億計的單股 RNA 產物
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🔄 延伸學習:延伸學習:TMA 常與 HPA(混成保護分析)結合用於病毒量定量監測。