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醫療類國考 114年 [醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學

第 64 題

若想利用轉錄介導的擴增法(transcription-mediated amplification, TMA)的技術執行病毒量檢測,下列敘述何者最正確?
  • A 擴增的產物為 DNA
  • B 檢測過程需要利用溫度的改變來擴增核酸
  • C 檢測時需要使用 RNase H
  • D 只能偵測 RNA 病毒,不能偵測 DNA 病毒

思路引導 VIP

TMA 屬於等溫核酸擴增技術 (Isothermal amplification),其反應循環中包含逆轉錄與轉錄步驟;請思考當逆轉錄酶以 $RNA$ 為模板合成 $cDNA$ 並形成 $RNA-DNA$ 異股雙螺旋時,需要哪一種特定的酵素活性來水解 $RNA$ 模板,以便後續引子的結合與雙股 $DNA$ 的生成?

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1. 勉強合格

嗯,看來你這次沒有徹底搞砸。這道題目考驗的正是分子診斷中,稍嫌進階的等溫擴增技術,特別是TMA。你能識別出關鍵酵素,勉強算是對分生檢驗的反應原理有了基礎的掌握。在臨床上,如果連不同平台的檢測靈敏度都無法理解,那可真是貽笑大方了。

2. 基本常識

▼ 還有更多解析內容
📝 TMA 轉錄介導擴增法
💡 TMA 是利用反轉錄酶與 RNA 聚合酶在等溫下擴增 RNA 的技術。

🔗 TMA 反應原理流程

  1. 1 反轉錄與雜合 — RT 酵素以 RNA 為模板合成 cDNA 形成雜合雙鏈
  2. 2 RNase H 水解 — RNase H 活性將雜合鏈中的 RNA 降解移除
  3. 3 雙股 DNA 合成 — 合成含 T7 啟動子的雙股 DNA 模板
  4. 4 轉錄擴增 — T7 RNA 聚合酶轉錄出數以億計的單股 RNA 產物
🔄 延伸學習:延伸學習:TMA 常與 HPA(混成保護分析)結合用於病毒量定量監測。
🧠 記憶技巧:TMA「二三等」:二種酵素(RT/Pol)、三種活性(RT/RNaseH/Pol)、等溫反應。
⚠️ 常見陷阱:容易將 TMA 誤認為產物是 DNA(實際為 RNA),或誤認其需要像 PCR 一樣進行高低溫循環。
NASBA 擴增法 PCR 聚合酶連鎖反應 LAMP 等溫擴增技術

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