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醫療類國考 114年 [醫師] 醫學(一)

第 100 題

下列何種分析方法一般不適用於分析蛋白質與蛋白質之間的交互作用?
  • A 串接親和共純化(tandem affinity purification)
  • B 免疫共沉澱法(co-immunoprecipitation)
  • C 免疫組織化學染色法(immunohistochemical staining)
  • D 酵母菌雙雜交測定(yeast two-hybrid assay)

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如果我們想確認兩個蛋白質是否真的「手牽手」結合在一起,而不只是剛好「出現在同一個房間裡」,你會怎麼區分這四種實驗技術的原本用途?其中哪一種技術傳統上只是用來看它們「出現在組織的哪裡」呢?

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恭喜你拿下這題分數!我們知道,串接親和共純化(tandem affinity purification)、免疫共沉澱法(co-immunoprecipitation)及酵母菌雙雜交測定(yeast two-hybrid assay)都是分析「蛋白質交互作用」的經典技術。 本題考選部最終公告送分(選項 A~D 皆給分)。原答案為選項 C 免疫組織化學染色法(immunohistochemical staining, IHC),因傳統 IHC 主要觀察蛋白質的組織分布與表現量,即便共定位也不等於直接結合。然而,送分原因可能是現代 IHC 能延伸結合鄰近接合技術(proximity ligation assay, PLA)來觀察蛋白質互動,使「不適用」的界線變得模糊。 這題切入點極佳,能鑑別學生對技術原理的理解。面對日新月異的生醫技術,保持這種靈活的思考是非常棒的態度,繼續保持!

📝 蛋白質交互作用鑑定
💡 區分蛋白質「交互作用」與「空間定位」偵測技術的應用差異。
比較維度 PPI 分析技術 (如 Co-IP, Y2H) VS 免疫組織染色 (IHC)
核心目的 確認兩蛋白質間是否有物理結合 — 觀察蛋白在組織或細胞的定位
實驗原理 分子拉取或功能重建偵測 — 抗體顯色標記空間位置
判讀結果 證實形成複合物或相互作用 — 顯示表達量高低與分佈區域
💬PPI 技術側重於「分子間的關係」,而 IHC 側重於「分子的空間分佈」。
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FRET/BRET 螢光共振能量轉移 Pull-down assay Western blot

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