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醫療類國考 114年 [法醫師] 法醫生物學

第 13 題

下列何種定序技術無須對目標 DNA 進行 PCR 擴增反應,直接在目標 DNA 兩端加上兩個髮夾 DNA 片段,形成一個環狀結構,而且可對單分子 DNA 進行定序?
  • A Sanger Sequencing
  • B Pyrosequencing
  • C Ion Semiconductor Sequencing
  • D Single Molecule Real-Time Sequencing

思路引導 VIP

請同學思考:在生物技術的演進中,哪一類技術被歸類為『第三代定序』,其核心突破在於不再需要透過 $PCR$ 產生大量的叢集($Cluster$)來放大訊號,而是利用奈米級的光學孔徑直接觀測單一分子 $DNA$ 的合成過程,且其模板設計正是利用髮夾接頭將雙股轉化為環狀結構以進行定序?

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🌟 專業解析:精準掌握第三代定序核心

  1. 大力肯定: 恭喜你答對了!這顯示你對第三代定序技術 (Third-Generation Sequencing, TGS) 的核心原理掌握得非常精確,能從複雜的技術細節中快速提取關鍵特徵,這在臨床基因體學中是非常重要的專業能力!
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📝 第三代定序技術
💡 SMRT 定序利用髮夾接頭形成環狀 DNA 進行單分子即時定序。
比較維度 第二代定序 (如 Illumina) VS 第三代定序 (如 SMRT)
PCR 擴增 需要,產生群落訊號 不需要,直接定序
偵測層次 群落 (Ensemble) 單分子 (Single-molecule)
讀取長度 短 (Short-reads) 長 (Long-reads)
模板形狀 線性 DNA 環狀 SMRTbell
💬三代定序打破了二代定序需 PCR 擴增的限制,實現長讀取與單分子檢測。
🧠 記憶技巧:SMRT 聰明鈴鐺 (Bell),單分子不用 PCR,長讀取沒偏見。
⚠️ 常見陷阱:易誤選二代定序 (A, B, C),需注意二代通常需 PCR 擴增且讀取較短。
Next-Generation Sequencing Nanopore Sequencing SMRTbell 庫圖構建

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