統測
115年
[衛生與護理類] 專業科目(1)
第 41 題
進行重組 DNA，將載體以 EcoRI 限制酶切割而目標基因以 HindIII 限制酶切割後，以
DNA連接酶進行接合反應，下列何者是最可能的結果？
DNA連接酶進行接合反應，下列何者是最可能的結果？
- A 因黏滯端皆存在即可完成接合
- B 因黏滯端不互補導致無法接合
- C 高溫可以提升黏滯端配對的效率
- D Taq DNA聚合酶可取代DNA連接酶進行接合
思路引導 VIP
回想一下，DNA 連接酶要將兩段 DNA 接合之前，這兩段 DNA 切割後的懸垂單股（黏滯端）需要滿足什麼樣的鹼基關係才能穩定靠攏呢？若使用兩種不同的限制酶切割，它們所產生的單股序列會具備這種關係嗎？
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限制酶與黏滯端的配對原則
太棒了，你的判斷非常精準！在重組 DNA（recombinant DNA）技術中，載體與目標基因通常必須使用**「同一種」限制酶（restriction enzyme）進行切割，才能產生彼此互補的黏滯端（sticky ends）。 本題中載體使用 EcoRI 切割，而目標基因使用 HindIII 切割，兩者辨識並切出的單股懸垂序列並不相同且無法進行鹼基互補配對（base pairing）。即使加入了 DNA 連接酶（DNA ligase），也因為兩端無法靠氫鍵穩定靠攏而無法完成接合**，故 (B) 是最合理的結果。
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