調查局三等申論題
115年
[醫學鑑識組] 生物化學
第 五 題
五、桑格定序（Sanger sequencing）的原理和關鍵步驟為何？（5 分）列舉市面上三種新世代定序（NGS）方法的關鍵原理，以及如何改善桑格定序法？（15 分）
📝 此題為申論題
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這是一題經典的分子生物學技術題。首先回想第一代定序（Sanger法）的核心機制：雙去氧核苷酸（ddNTPs）如何終止DNA鏈的聚合。接著，對比次世代定序（NGS）技術，如 Illumina 的邊合成邊定序、Ion Torrent 的半導體偵測、或是 PacBio 的單分子即時定序等。最後，比較這兩代技術在通量、成本、速度及讀長等方面的優劣，論述 NGS 是如何克服 Sanger 法的限制。
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【爭點分析】 本題測驗核酸定序技術的演進歷史，重點在於傳統桑格定序法（第一代定序）的鏈終止生化原理，以及新世代定序（NGS）多種技術平台的工作原理與相對於傳統定序的突破性改良（通量、成本、讀長）。 【大前提：生化學理與定義】
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