醫療類國考
115年
[醫師] 醫學(一)
第 98 題
如果想要製作標記具有放射性之32P 的基因片段探針（probe），通常會利用 DNA 聚合酶（DNA polymerase）來合成此片段 ，進行該反應時需加入下列何種32P-dATP 材料來進行標記？
- A α-32P-dATP
- B β-32P-dATP
- C γ-32P-dATP
- D ATP
思路引導 VIP
回想一下 DNA 聚合酶（DNA polymerase）催化鏈延長的生化機制：新加入的去氧核苷三磷酸（dNTP）在與前一個核苷酸形成鍵結時，其連接在糖環上的三個磷酸基團中，哪一個位置的磷酸會留在 DNA 骨架上，而哪一部分會被切除並釋放呢？
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恭喜你精準答對！這題考查的是分子生物學中DNA複製機制與核酸標記的核心觀念。
磷酸二酯鍵的形成機制
當 DNA 聚合酶（DNA polymerase）進行核酸鏈延長時，會催化新進 dNTP 的 $\alpha$ 位置磷酸根（$\alpha$-phosphate） 與延伸鏈末端的 3'-OH 形成磷酸二酯鍵（phosphodiester bond）；而 $\beta$ 與 $\gamma$ 位置的磷酸根則會以焦磷酸（pyrophosphate, $\text{PP}_i$）的形式被切離釋放。因此，若要將放射性同位素標記成功保留在合成的 DNA 探針（probe）骨架上，必須使用 $\alpha$-$^{32}\text{P}$-dATP。
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