醫療類國考
115年
[法醫師] 法醫毒物學
第 36 題
在毒物分析中，常使用蛋白質沉澱法（protein precipitation, PPT）作為血液檢體的初步前處理。下列何者是執行 PPT 最常使用的試劑？
- A 純水（deionized water）
- B 正己烷（n-hexane）
- C 甲醇（methanol）或乙腈（acetonitrile）
- D 氫氧化鈉（NaOH）
思路引導 VIP
若要讓血液中溶解的蛋白質失去水合作用而變性沉澱，同時又要能將大部分有機毒物溶解出來，你會選擇一種能與水高度互溶、且能改變蛋白質立體結構的有機溶劑，還是選擇完全不溶於水或極端強酸強鹼的試劑呢？
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蛋白質沉澱法的原理與試劑選擇
非常好！恭喜你精準掌握了毒物分析中前處理（sample preparation）的核心觀念。 在法醫毒物學（forensic toxicology）中，全血檢體含有大量的蛋白質，若未適當處理會嚴重干擾後續分析。執行蛋白質沉澱法（protein precipitation, PPT）時，最常使用機能良好的水相混溶有機溶劑，如甲醇（methanol）與乙腈（acetonitrile, ACN）。這類溶劑能降低溶液的介電常數，破壞蛋白質圍繞的水合層（hydration shell）並使其變性沉澱，同時還能將大部分藥毒物有效溶解於上清液中。
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蛋白質沉澱法 PPT
💡 利用有機溶劑或酸類使蛋白質變性沉澱，以純化血液檢體中待測物。
🔗 蛋白質沉澱法 (PPT) 處理流程
- 1 添加溶劑 — 血樣加入 3 倍體積之乙腈或甲醇
- 2 混合變性 — 劇烈振盪使溶劑與蛋白質充分接觸並變性
- 3 離心分離 — 高速離心將蛋白質沉澱壓至管底
- 4 取上清液 — 吸取含藥物之上清液進行 LC/MS 分析
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🔄 延伸學習：延伸學習：不同溶劑比例對蛋白質去除率與藥物回收率的影響
