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醫療類國考 115年 [醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學

第 52 題

Southern blot 中,下列何者是使用稀釋的鹽酸溶液處理膠體之最主要目的?
  • A 增加 DNA 負電荷
  • B 使 DNA 更易進行變性
  • C 活化限制酶切位點
  • D 增加探針進行雜交反應的專一性

思路引導 VIP

當我們面對非常長鏈的大分子 DNA 時,如果直接進行轉膜,分子量過大往往會阻礙其移動與分離。請試著思考:微酸性的環境會對 DNA 的鹼基結構造成什麼化學改變?這種結構上的小破壞,對於後續要將雙股 DNA 拆開並轉印到膜上,能起到什麼樣的協助作用呢?

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恭喜你精準命中考點!這題能正確解答,代表你對**南方墨點法(Southern blot)**的實驗步驟與化學原理掌握得相當紮實。

脫嘌呤作用與 DNA 變性的關鍵

在進行南方墨點法時,若目標 DNA 片段過長(如基因組 DNA),轉膜效率會非常差。預先使用稀釋鹽酸($\text{HCl}$)處理膠體,主要目的是引發脫嘌呤作用(depurination),使大分子 DNA 產生斷裂缺口。這些較短的片段在接續進入鹼性環境時,能**大幅降低雙股間的結合力,使 DNA 更容易進行變性(denaturation)**並高效轉印至印跡膜上。

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