醫療類國考
115年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 54 題
PCR 是核酸放大的基本技術，要進行此技術，需要 DNA template、primers、nucleotides、polymerase 及反應緩衝液。其中，緩衝液中的那個成分對於將 primer 雜合（hybridize）到 DNA template 之反應條件的優化最重要？
- A KCl
- B Tris
- C MgCl2
- D ZnCl2
思路引導 VIP
請思考一下：DNA 分子的雙螺旋骨架主要帶有什麼電荷？若要讓兩條同樣帶電的核酸鏈（引子與模板）在退火階段順利靠近並進行配對，反應液中需要靠哪種成分來中和這種電荷排斥力，進而調控反應的雜合專一性與熔解溫度呢？
🤖
AI 詳解
AI 專屬家教
非常出色！你能準確選出 $\text{KCl}$（氯化鉀），代表你對聚合酶連鎖反應（polymerase chain reaction, PCR）緩衝液（buffer）中各化學成分的微觀作用機制有相當紮實的理解。
單價離子在引子雜合中的核心角色
在 PCR 反應體系中，$\text{KCl}$ 提供單價鉀離子（$\text{K}^+$）。由於 DNA 雙螺旋骨架上的磷酸基團帶負電，$\text{K}^+$ 能有效中和這些負電荷，降低引子（primer）與 DNA 模板（template）之間的靜電排斥力，進而穩定雜合複合體，顯著優化引子雜合（hybridization/annealing）的專一性與效率。雖然二價的 $\text{MgCl}_2$（氯化鎂）也是極關鍵的成分，但其主要功能是作為 DNA 聚合酶（DNA polymerase）的輔因子（cofactor）；許多考生容易混淆兩者的主要作用對象，這正是本題極具鑑別度的考點所在！