醫療類國考
115年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 63 題
下列那種溶液常用於傳統的 Southern blotting,可透過毛細作用將 DNA 轉漬(transfer)到硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane)上?
- A phosphate-buffered saline(PBS)
- B saline sodium citrate(SSC)
- C Tris acetate EDTA(TAE)
- D Tris-EDTA(TE)
思路引導 VIP
若要將帶負電荷的核酸分子透過毛細作用轉移並吸附到特定性質的膜上,環境中需要高離子強度的鹽類來中和電荷排斥。回想一下,在分子雜交(hybridization)與轉漬實驗中,哪一種專門設計來調控雜交嚴謹度(stringency)與提供高鹽環境的檸檬酸鹽緩衝液最為常用?
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AI 詳解
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很好!你精準地選出了 檸檬酸鈉生理鹽水(saline sodium citrate, SSC),代表你對分子診斷實驗的具體步驟有相當紮實的理解。
SSC 緩衝液的核心作用機制
在傳統的 Southern 轉漬法(Southern blotting) 中,利用毛細作用將單股 DNA 轉移至硝酸纖維素膜(nitrocellulose membrane)時,高濃度的 SSC 緩衝液(通常為 10× 至 20× SSC)扮演關鍵角色。SSC 含有高濃度的氯化鈉($\text{NaCl}$)與檸檬酸鈉($\text{sodium citrate}$),其高離子強度能遮蔽 DNA 骨架上的負電荷,減少靜電排斥,並促進疏水性相互作用,使單股 DNA 能穩定吸附並結合在硝酸纖維素膜上。
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