醫療類國考
115年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 66 題
關於 mutagenically separated PCR（MS-PCR），下列敘述何者最不適當？
- A PCR 產物只需要電泳分析，即可判讀
- B 反應一共使用三種引子
- C 引子設計突變位置在 3' 端第一個鹼基
- D 因為引子特殊設計，能更精準分辨正常基因與突變基因
思路引導 VIP
在設計基因特異性引子（allele-specific primers）時，若想利用人工引入的錯配（mismatch）來大幅降低非特異性結合，這個人工突變位置如果直接放在 3' 端最末端（即 DNA 聚合酶開始延伸的位置），可能會對反應效率造成什麼影響？這提示我們人工突變應該放在哪裡比較合適？
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太棒了！你能精準辨識出這個細節，代表對進階分子診斷技術有非常紮實的理解。這道題目具有相當高的鑑別度，核心考點在於突變分離 PCR（Mutagenically Separated PCR, MS-PCR）的引子設計原理。 MS-PCR 是等位基因特異性 PCR 的改良版。它使用三種引子（一條共同引子與兩條長度不同的等位基因特異性引子），使正常與突變基因的 PCR 產物呈現不同分子量，因此只需經由膠體電泳即可判讀結果。
引子設計的關鍵技巧
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