普考申論題
106年
[衛生技術] 生物技術學概要
第 三 題
📖 題組:
二、請描述下列色層分析(Chromatography)方法的原理與應用。(每題 5 分,共 20 分) (一)分子篩色層分析法(Size-exchange chromatography 或稱 gel filtration chromatography) (二)離子交換色層分析法(Ion-exchange chromatography) (三)親和性色層分析法(Affinity chromatography) (四)疏水性色層分析法(Hydrophobic interaction chromatography)
二、請描述下列色層分析(Chromatography)方法的原理與應用。(每題 5 分,共 20 分) (一)分子篩色層分析法(Size-exchange chromatography 或稱 gel filtration chromatography) (二)離子交換色層分析法(Ion-exchange chromatography) (三)親和性色層分析法(Affinity chromatography) (四)疏水性色層分析法(Hydrophobic interaction chromatography)
📝 此題為申論題,共 4 小題
小題 (三)
親和性色層分析法(Affinity chromatography)
思路引導 VIP
看到「親和性色層分析法」,應立刻聯想到生物分子間的「專一性辨識與結合」(如抗原-抗體、酵素-受質)。解題時務必踩穩三個得分點:精確定義其專一性特性、詳述反應三步驟(結合、清洗、洗脫/沖提),並舉出實務上最常見的重組蛋白或抗體純化實例。
小題 (一)
分子篩色層分析法(Size-exchange chromatography 或稱 gel filtration chromatography)
思路引導 VIP
看到分子篩色層分析,首先聯想「依分子大小/形狀分離」的核心概念。答題時務必精準點出「大分子先流出、小分子後流出」的關鍵機制(小分子會進入微孔延長滯留時間),並列舉如去鹽、蛋白質純化或分子量測定等實務應用以獲取完整分數。
小題 (二)
離子交換色層分析法(Ion-exchange chromatography)
思路引導 VIP
看到離子交換色層分析,首先應聯想蛋白質的「等電點(pI)」與環境pH值的關係決定其表面淨電荷。其次,思考帶電分子與帶相反電荷的樹脂間的「靜電吸引力」結合,以及最後利用「鹽濃度梯度」或「pH值改變」進行競爭沖提的完整過程。
小題 (四)
疏水性色層分析法(Hydrophobic interaction chromatography)
思路引導 VIP
看到疏水性層析,首先聯想「水火不容」的特性以及「鹽析效應」。核心原理為利用高鹽濃度促使蛋白質表面疏水區域與管柱配體結合,再藉由降低鹽濃度來依序洗脫。答題時務必強調「高鹽結合、低鹽沖提」的機制,並帶出其常銜接於硫酸銨沉澱法之後的實務應用。