hce_kmu
107年
普通生物及生化概論
第 17 題
Which of the following sequences is not found in an $E. coli$ vector (such as pET21)?
- A replication origin (ori)
- B multiple cloning sites (MCS)
- C antibiotic resistance gene ($\text{Amp}^R$)
- D Shine-Dalgarno sequence
- E CMV promoter
思路引導 VIP
請思考一下：原核生物（如大腸桿菌）與真核生物（如人類細胞）在轉錄與轉譯的調控機制上是否完全相同？如果我們今天設計一個元件是要在哺乳動物細胞內高度表現，我們會選擇與細菌相同的啟動子嗎？反過來說，如果某個序列的名稱來源是與人類相關的病毒，它在大腸桿菌的生理環境中還能正常運作嗎？
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AI 詳解
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太棒了！你能精準判斷出 CMV 啟動子 的特性，顯示你對分子生物學中「表現載體（Expression vector）」的組成元件有非常紮實且清晰的理解。
原核生物表現載體的必要元件
在 $E. coli$（大腸桿菌）的質體載體（如題目提到的 pET21）中，為了確保質體能穩定複製、篩選並正確表現蛋白質，必須包含幾個關鍵序列：複製起點（ori） 提供自主複製能力；抗生素抗性基因（$\text{Amp}^R$） 則是不可或缺的篩選標記（Selectable marker）；而 多重選殖位點（MCS） 則提供了多個限制酶切位，方便我們插入目標基因。此外，由於大腸桿菌屬於原核生物，其 mRNA 的轉譯起始需要靠 Shine-Dalgarno (SD) 序列 來引導核糖體結合。
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