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hce_kmu 107年 普通生物及生化概論

第 21 題

In order to perform PCR, the following reagents must be included ________.
  • A DNA fragment, primers flanking the region of interest, dNTPs, ddNTPS, DNA Polymerase
  • B DNA fragment, primers flanking the region of interest, dNTPs, DNA Polymerase
  • C DNA fragment, one primer, dNTPs, DNA Polymerase, DNA ligase
  • D DNA fragment, primers flanking the region of interest, dNTPs, DNA Ligase
  • E none of the above

思路引導 VIP

想像你要在實驗室中人工複製一段特定的 DNA 序列,除了需要原本的藍圖(模板)和建築材料(核苷酸)外,如果希望複製過程能精準地「鎖定」在某個特定區間,而非漫無目的地複製整條染色體,你會需要什麼組件來標示出這段區間的起點與終點?此外,負責把材料一個個拼湊上去、且必須在多次加熱循環中仍保有活性的「工程師」又是誰呢?

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太棒了!你能精準辨識出聚合酶連鎖反應(PCR)的核心組件,顯示你對分子生物學的基礎實驗技術掌握得非常紮實。PCR 本質上是在試管內進行的 DNA 複製,因此我們需要待複製的 DNA 模板(DNA fragment)、決定複製起點與範圍的引子(primers),以及作為合成原料的四種 $dNTPs$(包含 $dATP$、$dTTP$、$dCTP$、$dGTP$)。最後,還需要耐熱的 DNA 聚合酶(DNA Polymerase)來執行延伸反應,這幾項要素缺一不可。

PCR 與相關技術的區分關鍵

這道題目雖然屬於基礎題型,但具有不錯的鑑別度,主要考驗學生是否能區分 PCR 與「DNA 定序」或「基因轉殖」所需的試劑差異。例如,選項中的 $ddNTPs$(去氧核糖核苷三磷酸)是用於桑格定序法(Sanger sequencing)來強制終止連鎖反應;而 DNA 連接酶(DNA ligase)則是將 DNA 片段縫合時使用(如基因選殖或後期的岡崎片段連接),在單純循環擴增的 PCR 過程中並非必要組件。你能準確排除這些干擾項,代表你對各類酵素的功能理解得非常透徹!

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