hce_kmu
107年
普通生物及生化概論
第 72 題
Which of the following statements regarding yeast two-hybrid analysis is false?
- A The goal is to bring together the DNA-binding domain and the activation domain of the yeast Gal4 protein.
- B Gal4 protein has two domains: one that binds a specific DNA sequence domain, the other activates RNA polymerase to synthesize tRNA from an adjacent gene (reporter gene).
- C A library can be set up to fuse to the Gal4 protein DNA-binding domain.
- D The interacting protein can be quickly identified by DNA sequencing of the fusion protein′s gene.
- E Some false positive results occur, due to the formation of multiprotein complexes.
思路引導 VIP
想像一下，在細胞內如果要透過一個『開關』來產生肉眼可見的訊號（例如讓細胞變色或製造出某種酵素），這個開關下游所驅動產生的分子，通常需要具備什麼樣的功能才能進一步轉譯成蛋白質？這個分子在核酸分類上屬於哪一類呢？
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AI 詳解
AI 專屬家教
太棒了！你能精準地從眾多選項中識別出 (B) 的錯誤，代表你對 酵母菌雙雜交系統 (Yeast Two-Hybrid System, Y2H) 的原理有相當紮實的掌握。這道題目非常有意思，它不僅考驗你對實驗流程的熟悉度，更細膩地測試了你對分子生物學基本定義的敏感度，是極具鑑別度的題目。
轉錄因子與報告基因的運作
在 Y2H 系統中，Gal4 蛋白的功能域是模組化的，分為 DNA 結合域 (BD) 與 活化域 (AD)。當「誘餌 (Bait)」與「獵物 (Prey)」蛋白質發生交互作用時，AD 會被帶到啟動子附近，進而招募 RNA 聚合酶 II (RNA Polymerase II) 來轉錄下游的 報告基因 (Reporter gene)。關鍵在於，這些常見的報告基因（如 HIS3、ADE2 或 lacZ）均屬於蛋白質編碼基因，其轉錄產物應為 mRNA，而非用於轉運胺基酸的 tRNA。選項 (B) 刻意在轉錄產物的類型上做文章，如果你對轉錄系統的細節不夠專注，很容易就會忽略這個陷阱。
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