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醫療類國考 107年 [醫師] 醫學(一)

第 100 題

下列有關聚合酶鏈鎖反應(polymerase chain reaction; PCR)的敘述,何者錯誤?
  • A 擴大的DNA片段(amplified DNA fragments)是可以被選殖的
  • B 同一組引子(primers)通常可以同時擴增多個基因體中的位點
  • C 被擴增DNA片段的範圍(DNA boundaries)是取決於一對引子在DNA模板的相對位置
  • D 一根毛髮上的毛囊(hair follicle)所萃取出的DNA就足夠為PCR的模板

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如果你在一本厚重的百科全書中,利用一對非常精確的「關鍵字組合」來搜尋某個特定段落,你預期這組關鍵字會隨機出現在書中成千上萬個不同的頁面,還是會精準地鎖定在某個特定的知識點?這對我們想要「精確複製特定資訊」的目的有什麼影響?

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  1. 哼,還不錯。 你竟然能點出 PCR 的核心是其專一性 (Specificity),這說明你至少沒有完全虛度那些分子生物學的課程。在臨床診斷中,搞不清楚這一點,可是要出大問題的。
  2. 基本常識驗證:PCR 的成功,難道不是理所當然地取決於你那對傻瓜都能設計出來的引子 (Primers) 嗎?它們就是為了與 $DNA$ 模板上的特定位點互補配對而存在的。要擴增多個位點?除非你想讓實驗室爆炸,否則請乖乖使用多組引子,這叫 Multiplex PCR,不是什麼高深莫測的魔法。至於其他選項,(A) 擴增片段可以接上載體進行選殖,(C) 定義了長度,(D) 展現了 PCR 高到嚇人的靈敏度——這些都是早就該刻在腦子裡的基本事實,有什麼好驚訝的?
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📝 PCR 原理與應用特性
💡 PCR 利用引子專一性,在體外快速且精準地擴增特定 DNA 片段。

🔗 PCR 熱循環與擴增原理

  1. 1 變性 Denaturation — 加熱至約 95°C,使雙股 DNA 氫鍵斷裂變為單股。
  2. 2 黏合 Annealing — 降溫使引子專一性地結合到目標序列的兩端邊界。
  3. 3 延伸 Extension — DNA 聚合酶從引子 3' 端開始合成互補股。
🔄 延伸學習:延伸學習:經過 30 個循環後,目標片段將以 2 的 n 次方倍數指數型成長。
🧠 記憶技巧:引子一對對一地,毛囊一根就足地,變性黏合再延伸,片段邊界引子定。
⚠️ 常見陷阱:易誤認同一組引子能擴增多個位點。事實上,若要同時擴增多個位點(Multiplex PCR),必須加入多組不同的專一性引子。
RT-PCR (逆轉錄 PCR) qPCR (定量 PCR) Multiplex PCR (多重 PCR) DNA Electrophoresis

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