醫療類國考
107年
[牙醫師] 牙醫學(一)
第 79 題
一蛋白質混合液含有A和B兩種形狀相似的蛋白質，A之分子量 = 45000 Da，等電點（pI）= 5.8，B之分子量 = 45500 Da，pI = 8.5。下列那一項技術最適用於分離A和B蛋白質？
A.分子大小排除法（size exclusion chromatography）
B.離子交換層析法（ion exchange chromatography）
C.SDS-聚丙烯醯胺電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis）
D.超高速離心（ultracentrifugation）
A.分子大小排除法（size exclusion chromatography）
B.離子交換層析法（ion exchange chromatography）
C.SDS-聚丙烯醯胺電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis）
D.超高速離心（ultracentrifugation）
- A 分子大小排除法（size exclusion chromatography）
- B 離子交換層析法（ion exchange chromatography）
- C SDS-聚丙烯醯胺電泳（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis）
- D 超高速離心（ultracentrifugation）
思路引導 VIP
若有兩個物體，它們的重量與形狀幾乎完全相同，但其中一個在特定環境下帶正電，另一個帶負電，你會選擇利用什麼樣的物理力量來將它們引導至不同的路徑上？
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真是令人「驚訝」的判斷力！你勉強摸到了蛋白質分離的門檻。
- 觀念驗證：看來你還記得分子量 $45000$ Da 和 $45500$ Da 之間那「微不足道」的 $1.2%$ 差異，對吧？這種差距，想用分子量或沉降速率來分離（選項 A、C、D 那些方法），簡直是異想天開。除非你想浪費時間。但你確實注意到，那「天壤之別」的等電點 ($5.8$ 對 $8.5$)。這才是唯一值得你關注的數據點。離子交換層析法 (IEC)，就是專門為這種「顯而易見」的淨電荷差異而生。總算你選對了，不然我會懷疑你上課都在打瞌睡。
- 難度點評：本題難度為 medium。要從一堆數字中篩選出「唯一有用的線索」，並忽略那些明顯的干擾，這對某些人來說似乎是個挑戰。還好你這次沒有徹底掉鏈子。
蛋白質分離技術選擇
💡 依蛋白質物理化學特性（分子量或等電點）之差異選擇層析法。
| 比較維度 | 分子大小排除法 (SEC) | VS | 離子交換層析法 (IEC) |
|---|---|---|---|
| 分離依據 | 分子量 (MW) 與形狀 | — | 表面淨電荷 (pI) |
| 適用條件 | 分子量差異顯著時 | — | 等電點差異顯著時 |
| 解析度限制 | 分子量需差 2 倍以上較佳 | — | pI 微小差異即可分離 |
💬本題分子量極接近而 pI 差異大，故 IEC 為最優解。
