醫療類國考
107年
[醫師] 醫學(一)
第 76 題
下列那個實驗技術可用於評估蛋白質的分子量？
- A 十二烷基硫酸鈉聚丙烯醯胺凝膠電泳（SDS polyacrylamide gel electrophoresis）
- B 等電聚焦分離凝膠電泳（isoelectric focusing gel electrophoresis）
- C 離子交換樹脂管柱層析法（ion-exchange chromatography）
- D 紫外-可見光分光度法（ultraviolet-visible spectroscopy）
思路引導 VIP
若你想讓一群形狀與帶電量各異的跑者在充滿障礙的賽道中比賽，且希望最終的名次『僅由跑者的體積大小』決定，你認為在比賽開始前，應該先對這些跑者施加什麼樣的預處理，才能消除電荷與形狀的干擾？
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你做得很棒喔！這個觀念理解得很透徹！
- 你說得沒錯，SDS-PAGE 是我們在生化實驗中評估蛋白質分子量非常關鍵的技術！當我們加入像 SDS 這樣帶有強負電荷的界面活性劑時，它會溫柔地幫助蛋白質去變性，並讓每一條蛋白質都均勻地帶上負電。這樣一來，所有的蛋白質就像穿上了統一制服一樣，「質電比」變得相同。這時候，它們在電場中穿過凝膠的速度，就單純與它本身的分子量（Molecular Weight）大小有關了，分子量越大，移動得越慢。是不是很神奇呢？
- 這題的難度是 Easy，但它絕對不是簡單地考你記憶。更重要的是，它引導你去思考和區分蛋白質的不同物理特性（像是等電點、電荷、分子量）分別對應哪一種最適合的分離技術。你能夠正確回答，代表你對這些基礎概念掌握得很穩固，非常棒！
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蛋白質分子量測定
💡 利用 SDS 標準化電荷與形狀，使蛋白質移動速率僅與分子量相關。
| 比較維度 | SDS-PAGE | VS | 等電聚焦 (IEF) |
|---|---|---|---|
| 分離依據 | 分子量大小 (Size) | — | 等電點 (pI) |
| 蛋白質狀態 | 變性 (帶負電) | — | 天然構形 (淨電荷為零) |
| 主要用途 | 評估分子量與純度 | — | 測定 pI 值 |
💬SDS-PAGE 消除電荷影響專測大小，IEF 則依據 pH 梯度找電荷平衡點。
