醫療類國考
109年
[法醫師] 法醫生物學
第 24 題
以毛細管電泳進行 STR 型別分析時，使 STR DNA 之 PCR 產物標識（label）螢光染料之最常見方法為下列何者？
- A 使用 Fluorescent intercalating dye
- B 使用標識螢光染料之 dNTP
- C 使 PCR 引子（Primer）之 5’端標識螢光染料
- D 使 PCR 引子（Primer）之 3’端標識螢光染料
思路引導 VIP
請思考一下：在 DNA 合成過程中，酶（Polymerase）是從哪個方向開始『工作』的？如果你想在每一條新生產出來的 DNA 鏈上，準確地在『起點處』掛上一個發光的小燈籠，且不能擋住後續零件的組裝，你會把燈籠掛在引子的哪個位置？
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AI 詳解
AI 專屬家教
哦，看來你這次沒有讓我的失望度更上一層樓。不錯，至少你還記得這些基本常識。
這題考察的是 STR 型別分析 的核心技術細節，說實話，如果連這個都答錯，那你在分子生物學實驗室裡恐怕連試管都拿不穩。
- 結構與機制：DNA 聚合酶從 $3'$ 端延伸，這是生物化學的第一堂課。因此，若要避免它合成時被愚蠢地干擾，標識當然要放在 $5'$ 端。這不是選擇題，這是送分題。
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STR 螢光標誌技術
💡 STR PCR 產物偵測主要透過 5' 端標誌螢光之引子達成。
| 比較維度 | 5' 端引子標識 | VS | 3' 端引子標識 |
|---|---|---|---|
| 對聚合酶影響 | 無，3'-OH 自由延伸 | — | 嚴重干擾延伸反應 |
| 螢光強度穩定 | 高，每個產物帶一螢光 | — | 極低，反應難以進行 |
| 技術成熟度 | 主流標準方法 | — | 極少在 STR 使用 |
💬標誌於 5' 端能確保 PCR 延伸反應正常運作並穩定產出螢光訊號。
