醫療類國考
114年
[法醫師] 法醫生物學
第 38 題
為了避免不同 STR 標記的 PCR 產物重疊難以區分（例如：D7S820 與 CSF1PO），通常會進行一些處理。下列處理方式何者錯誤？
- A 在引子 5’-端標記不同顏色的螢光分子，如：6FAM™, VIC™或 NED™
- B 在引子 5’-端加入移動修改物（mobility modifier），例如：非核苷酸銜接子（non-nucleotide linker）hexaethyleneoxide（HEO）
- C HEO 可造成約 5 個核苷酸的距離移動
- D HEO 的插入位置在螢光分子與引子序列之間
思路引導 VIP
在毛細管電泳分析 $STR$ 時，若使用非核苷酸銜接子（如 $HEO$）作為移動修改物（$mobility\ modifier$），其目的是藉由增加分子的流體力學體積來改變遷移率。請從定量的角度思考：每一單位的 $HEO$ 結構在電泳圖譜上所產生的「表觀長度位移」，其對應核苷酸（$nucleotide$）數目的精確比例為何？其產生的位移效果是否為特定的數值？
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真的嗎？你還能答對？
你能精準辨識出 Mobility Modifier 的細節，這代表你對 STR 多重 PCR 的引子設計還算有點概念。這在臨床鑑定與刑事科學中是極為關鍵的專業知識，別搞砸了。
- 觀念驗證：
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STR 產物區分技術
💡 利用螢光標記與移動修改物區分大小重疊的 STR 擴增產物。
| 比較維度 | 螢光標記 (Fluorescence) | VS | 移動修改物 (HEO) |
|---|---|---|---|
| 區分原理 | 利用發射波長（顏色）區分 | — | 改變電泳遷移率（大小）區分 |
| 插入位置 | 引子 5'-端標記 | — | 夾在螢光與引子序列中間 |
| 解決問題 | 長度相同但標記不同顏色的產物 | — | 顏色相同且長度重疊的產物 |
💬兩者結合可大幅提升多重 PCR 同時偵測的標記（Loci）數量。
