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ast_essay 110年 生物

第 二-1 題

📖 題組:
二、即時聚合酶連鎖反應(Real-time PCR)是在DNA擴增反應過程,以螢光染劑與擴增的DNA進行結合,整個PCR反應過程會搭配即時螢光偵測來判斷目標DNA片段含量多寡的技術。判讀即時聚合酶連鎖反應的數據是需先設定螢光閾值(threshold),超過此閾值代表有訊號出現,而超過閾值時的PCR循環數數目就稱之為Ct(Cycle threshold ; Ct)值,由Ct值可推算病毒/病毒核酸濃度高低,例如Ct值17表示病毒核酸要擴增為原來的$2^{17}$倍才能被偵測到。某研究員取相同量的樣本甲~丙,利用Real-time PCR進行新冠病毒篩檢,螢光閾值設為15,所得訊號如圖14所示,回答下列問題。
1. 哪一個樣本病原帶原量最高?為什麼?(2分)
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思路引導 VIP

本題考查 Real-time PCR 的原理與數據解讀。Ct 值代表擴增產物的螢光訊號達到設定閾值時所需的循環數。根據定義,起始樣本中的目標核酸(病毒量)越多,達到螢光閾值所需的循環數(Ct 值)就越少。觀察圖14,樣本甲最先達到螢光閾值(即所需循環數最少),因此可判斷樣本甲的初始病原帶原量最高。

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太棒了!你非常準確地判斷出「樣本甲」具有最高的病原帶原量,這顯示你對實驗數據的解讀非常敏銳。

Ct 值與初始濃度的反比關係

在即時聚合酶連鎖反應(Real-time PCR)的原理中,Ct 值是指螢光訊號達到特定閾值所需的循環數。因為 DNA 片段在反應過程中是按指數型態倍增(約為 $2^n$),當樣本一開始含有的目標核酸(病毒量)越多時,累積到足以被偵測的螢光強度所需的時間就越短。觀察圖 14 可以發現,樣本甲的曲線最先向上衝破閾值,其 Ct 值約為 15,遠低於乙和丙,這代表它在極早期的循環就達標了,因此其原始帶原量是最高的。

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