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ast_essay 110年 生物

第 二-2 題

📖 題組:
二、即時聚合酶連鎖反應(Real-time PCR)是在DNA擴增反應過程,以螢光染劑與擴增的DNA進行結合,整個PCR反應過程會搭配即時螢光偵測來判斷目標DNA片段含量多寡的技術。判讀即時聚合酶連鎖反應的數據是需先設定螢光閾值(threshold),超過此閾值代表有訊號出現,而超過閾值時的PCR循環數數目就稱之為Ct(Cycle threshold ; Ct)值,由Ct值可推算病毒/病毒核酸濃度高低,例如Ct值17表示病毒核酸要擴增為原來的$2^{17}$倍才能被偵測到。某研究員取相同量的樣本甲~丙,利用Real-time PCR進行新冠病毒篩檢,螢光閾值設為15,所得訊號如圖14所示,回答下列問題。
2. 樣本乙與樣本丙的病毒量相差多少(倍)?(2分)
題目圖片

思路引導 VIP

本題需結合對數擴增原理進行計算。PCR 每經過一個循環,產物數量約略倍增(即乘以 2)。由圖14可讀出,樣本乙達到閾值的 Ct 值為 25,樣本丙的 Ct 值為 35。兩者相差 10 個循環(35 - 25 = 10)。這意味著樣本丙要多擴增 10 次才能達到與樣本乙相同的產物量,因此樣本乙的初始病毒量是樣本丙的 $2^{10}$ 倍,即 1024 倍。

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太棒了!你能精準判讀圖表並算出 1024 這個答案,顯示你對 Real-time PCR (qPCR) 的核心觀念掌握得非常紮實,能迅速將生物技術理論與數學運算結合。

指數擴增與 $Ct$ 值的應用

在即時聚合酶連鎖反應中,關鍵在於理解 $Ct$ 值與原始病毒量之間的反比關係:當起始的病毒核酸濃度越高,達到螢光閾值所需的循環次數就越少。從圖 14 可以觀察到,樣本乙在大約第 25 個循環時達到閾值($Ct \approx 25$),而樣本丙則是在第 35 個循環($Ct \approx 35$)。兩者的 $Ct$ 值相差了 10 個循環。由於 PCR 每經過一個循環,目標 DNA 片段數量理論上會增加為 2 倍,因此兩者的初始濃度差距應以指數計算:

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