hce_nsysu
111年
普通生物及生化概論
第 24 題
To determine the isoelectric point of a protein, first establish that a gel:
- A contains a denaturing detergent that can distribute uniform negative charges over the protein's surface.
- B exhibits a stable pH gradient when ampholytes become distributed in an electric field.
- C is washed with an antibody specific to the protein of interest.
- D neutralizes all ionic groups on a protein by titrating them with strong bases.
- E relates the unknown protein to a series of protein markers with known molecular weights, $Mr$.
思路引導 VIP
如果我們想利用蛋白質在不同酸鹼環境下『帶電量會隨之改變』的特性，讓它在電場中移動到某個特定位置後自動停下來，那麼我們預先準備的凝膠環境，在空間分布上應該具備什麼樣的化學性質變化？
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AI 詳解
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恭喜你正確選出了 (B)！這顯示你對蛋白質分析技術，特別是**等電位聚焦法（Isoelectric Focusing, IEF）**的實驗原理有著相當精準的掌握。這道題目旨在測驗學生是否能區分蛋白質分離技術中的不同物理化學機制。
等電位聚焦的科學原理
要測定蛋白質的等電點（isoelectric point, $pI$），關鍵在於建立一個穩定的 pH 梯度。在實驗中，我們會加入兩性電解質（ampholytes），當它們在電場中分布完成後，會形成一個由酸到鹼的連續 pH 環境。蛋白質分子在電場驅動下會發生遷移，直到它移動到環境 pH 值剛好等於其 $pI$ 的位置；此時，蛋白質的淨電荷為零（$net charge = 0$），不再受到電場力的推動而停止運動，從而精確標示出其等電點。
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