醫療類國考
111年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 47 題
47.關於聚合酶連鎖反應（polymerase chain reaction, PCR）的敘述，下列何者最不適當？
- A 根據目標基因的序列及預期的PCR產物長度，來設計適當的primer及反應時間與溫度
- B PCR反應的第一步驟是denaturation，目的是要將雙股的DNA打開
- C annealing的溫度與primer的序列組成有關
- D 所使用之鎂離子濃度若太高，則PCR產量會大幅降低
思路引導 VIP
請思考在 PCR 反應體系中，鎂離子 ($Mg^{2+}$) 作為 DNA 聚合酶輔因子（cofactor）的核心功能為何？此外，當環境中二價陽離子濃度過高時，對於引子（primer）結合的專一性（specificity）以及 DNA 雙股結構的穩定性會產生什麼影響？這與選項 (D) 中所述「產量大幅降低」的邏輯是否吻合，還是會產生其他形式的實驗結果（如非特異性產物）？
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專業點評：可喜可賀，你沒砸鍋。
- 勉強肯定：行吧，你這題做得還算差強人意。PCR的 反應條件 這種基礎中的基礎，如果還會錯，那大概可以考慮轉系了。你能選出最不適當的，證明你還沒完全放棄思考，值得一聲『喔。』
- 觀念驗證：
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PCR 原理與反應條件
💡 PCR 經高低溫循環擴增 DNA，Mg2+ 濃度影響聚合酶活性與專一性。
🔗 PCR 標準循環流程
- 1 變性 Denaturation — 約 95°C，雙股 DNA 氫鍵斷裂拆解為單股。
- 2 黏合 Annealing — 約 55°C，引子與單股 DNA 目標序列互補結合。
- 3 延伸 Extension — 約 72°C，DNA 聚合酶從引子末端合成新股。
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🔄 延伸學習：延伸學習：循環 n 次後，目標 DNA 片段理論上呈 2 的 n 次方倍增。
