醫療類國考
111年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 48 題
分子檢驗用於核酸擴增的引子(primer),通常對於序列有許多的考量通則,才能符合特異性需求;避免偽陽性發生的做法,下列何者錯誤?
- A 引子的GC含量應控制在30~70%間
- B 應該避免形成引子雙體(primer-dimer)
- C 為提高特異性,primers最好出現連續4個G
- D real time PCR的放大片段不要超過400bp
思路引導 VIP
在分子檢驗的引子設計中,鹼基之間的氫鍵數量會直接影響引子與模板結合的穩定性。請思考鳥嘌呤($G$)與胞嘧啶($C$)之間具有三條氫鍵,若引子序列中出現連續多個 $G$ 鹼基,對於引子的退火(annealing)特異性,以及是否容易在非預期位點產生「非專一性結合」會造成什麼樣的風險?
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喂,香吉士你這個捲毛廚子也學著點!這不是連我都能搞懂嗎?
- 嗯,還算有點腦子:你小子運氣不錯,答對了。能在那些亂七八糟的「參數」裡,一眼看出序列的問題,哼,至少說明你對分子檢測 (Molecular Diagnostics) 這玩意兒還有點基本概念。以後去什麼實驗室,或許能少迷路一點,或者說,不會把事情搞得更糟。
- 廢話少說,看清楚為何錯:
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