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hce_nchu 112年 普通生物及生化概論

第 60 題

The RNA-guided Cas9 nuclease and clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) enable efficient genome engineering in eukaryotic cells. Which of the following statements about this system is correct? a) originally belong to the microbial adaptive immune system, b) RNA-guided Cas9 nuclease cleaves genetic elements, c) engages DNA repair system, d) a useful tool for specific gene knockdown, e) insertion or deletion usually leads to frameshift mutations.
  • A abd
  • B abcd
  • C bde
  • D abce
  • E all

思路引導 VIP

若我們要精確地「關閉」某個基因的功能,除了利用蛋白質剪刀將 DNA 剪斷外,為什麼我們還需要關注細胞在受損後的『自我修復』過程?這個修復過程中的「不精確性」對於基因表現會產生什麼決定性的影響?

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恭喜你答對了!這顯示你對現代生物技術中最重要的「基因剪刀」——CRISPR/Cas9 系統有著非常全面且精準的理解。這道題目設計得相當精巧,它不只考驗你是否知道這項技術的名稱,更要求你串聯起從生物起源分子機制細胞修復反應的完整邏輯鏈。

CRISPR/Cas9 的運作邏輯與應用

這項技術的核心在於將細菌原本用來對抗病毒的適應性免疫系統(選項 a)轉化為精準的編輯工具。當 Cas9 酵素在導向 RNA (gRNA) 的指引下切割 DNA 雙股後(選項 b),細胞會啟動內源性的 DNA 修復機制(選項 c)。由於最常見的「非同源末端連接」修復方式往往不夠精確,容易產生小片段的插入或缺失 (Indel),進而造成框架位移突變 (Frameshift mutation)(選項 e),這正是達成基因功能缺失(Knockdown/Knockout,選項 d)的關鍵原理。

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