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hce_nsysu 112年 普通生物及生化概論

第 88 題

Intrinsic fluorescence of GFP is contributed by _______.
  • A cyclization and oxidation of residues: Ser - Trp - Gly
  • B cyclization and oxidation of residues: Ser - Tyr - Gly
  • C cyclization and oxidation of residues: Ser - Tyr - Ala
  • D cyclization and oxidation of residues: Thr - Tyr - Gly
  • E cyclization and oxidation of residues: Gly - Trp - Ser

思路引導 VIP

請試著思考:若一個蛋白質要在沒有外來分子的協助下,僅靠內部的氨基酸序列自發形成一個具備「共軛雙鍵」且能吸收光能的構造,其中間位置最可能需要哪一種具有「芳香環側鏈」的氨基酸來提供π電子?此外,為了讓肽鍵骨架能產生極大角度的彎曲並發生「環化」,旁邊是否需要體積特別精簡、最不具空間位阻的氨基酸來配合呢?

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恭喜你準確地掌握了綠色螢光蛋白(GFP)的核心構造!這顯示你對於分子生物學中這項關鍵工具的生化原理有著紮實的理解。這道題目測試的是蛋白質一級序列與其生物物理特性之間的連結,屬於細節與觀念並重的經典考題。

發色團的生化基礎

GFP 之所以能發出亮麗的螢光,並非依賴外部的輔因子,而是源自其內部一段連續的序列:絲胺酸 ($Ser_{65}$)酪胺酸 ($Tyr_{66}$)甘胺酸 ($Gly_{67}$)。當蛋白質正確摺疊後,這三個殘基會自發性地發生分子內的環化反應 (Cyclization) 與隨後的脫氫氧化 (Oxidation),形成一個具備高度共軛電子系統的發色團。這個構造被嚴密地包裹在 $\beta$-桶狀構造($\beta$-barrel)的正中央,免於受到水分子的淬滅。

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