調查局三等申論題
112年
[醫學鑑識組] 遺傳學
第 四 題
四、請說明兩種臺灣地區市面上常見的次世代核酸定序（NGS）原理和關鍵步驟，並比較其準確度、成本、工作時間及其他項目的優劣。（20 分）
📝 此題為申論題
思路引導 VIP
思考方向：看到「次世代定序（NGS）」，應立即聯想市占率最高、法醫與臨床常見的兩大平台（如 Illumina 的邊合成邊定序與 Ion Torrent 的半導體定序）。答題需按「原理」、「關鍵步驟」與「優劣比較（準確度、成本、時間等）」三層次條列，展現對分子生物技術實務的熟悉度。
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【破題】 次世代核酸定序（Next-Generation Sequencing, NGS）相較於傳統定序，具備高通量、大規模平行定序的特點。目前臺灣市面上常見的兩種 NGS 技術為「Illumina 邊合成邊定序」與「Ion Torrent 半導體定序」。 【論述】
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次世代定序 Pyrosequencing
把 bead放到PicoTiter Plate一孔一顆 bead。依序加入四種鹼基。需要 A
DNA polymerase就會加入 A 同時釋放PPi
PPi 不會直接發光。 經過ATP sulfurylase ATP 再提供 Luciferase作用。形成Light
我之前學的另一種次世代定序是這個，好像跟你說的Ion Torrent 定序不一樣
NGS 技術比較與分析
💡 掌握 Illumina 與 Ion Torrent 之定序原理、擴增方式與優劣差異。
| 比較維度 | Illumina 定序 | VS | Ion Torrent 定序 |
|---|---|---|---|
| 偵測信號 | 光學螢光訊號 | — | 氫離子電壓變化 |
| 擴增方式 | 橋式 PCR (Bridge) | — | 乳化 PCR (Emulsion) |
| 準確度/缺點 | 極高，穩定判讀 | — | 同聚物易產生 Indel |
| 工作時間 | 較長 (1-3天) | — | 較快 (< 24小時) |
💬Illumina 適合高通量高準度分析；Ion Torrent 適合小型建置與急件檢驗。
