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高考申論題 114年 [食品衛生檢驗] 食品分析與檢驗

第 一 題

📖 題組:
胺基酸的分離與鑑定可使用高效能液相層析法進行分析,請說明以下問題: (一)利用高效能液相層析法(High pressure liquid chromatography,HPLC)分離食品中胺基酸的原理與操作步驟。(10 分) (二) HPLC 的分離管柱有不同的種類,包含正相層析管柱(Normal phase columns)、逆相層析管柱(Reverse phase columns)、離子交換管柱(Ion exchange columns)、膠體滲透管柱(Gel permeation columns)及膠體過濾管柱(Gel filtration columns)等,請分別說明上述管柱的分離原理、適用的流動相與樣品性質。(15 分)
📝 此題為申論題,共 2 小題

小題 (一)

利用高效能液相層析法(High pressure liquid chromatography,HPLC)分離食品中胺基酸的原理與操作步驟。(10 分)

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看到胺基酸 HPLC 分析,首要聯想「胺基酸缺乏發色/螢光基團,必須經過衍生化反應」此一核心關鍵。答題應依循標準檢驗流程,按「分析原理、樣品前處理(蛋白質水解)、衍生化步驟、儀器分離條件、定性定量方法」的邏輯順序條理撰寫。

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【破題】 胺基酸本身多數缺乏發色基團或螢光特性,無法直接以一般偵測器靈敏檢測,因此利用 HPLC 進行分析時,核心關鍵在於透過「衍生化反應」賦予其光學特性,再經由層析管柱分離與偵測。 【論述】

小題 (二)

HPLC 的分離管柱有不同的種類,包含正相層析管柱(Normal phase columns)、逆相層析管柱(Reverse phase columns)、離子交換管柱(Ion exchange columns)、膠體滲透管柱(Gel permeation columns)及膠體過濾管柱(Gel filtration columns)等,請分別說明上述管柱的分離原理、適用的流動相與樣品性質。(15 分)

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考生看到此題應先盤點這五種層析法的核心機制:正/逆相看「極性」、離子交換看「電荷」、膠體滲透/過濾看「分子大小(空間排阻)」。接著針對每一項,依序且結構化地列出「分離原理」、「適用的流動相」與「適用樣品性質」,確保條理分明以利閱卷委員給分。

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【破題】 高效能液相層析(HPLC)依據靜止相與目標分析物間的交互作用機制不同,可分為多種管柱類型。以下分別說明五種常見層析管柱之分離原理、流動相與適用樣品: 【論述】

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