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醫療類國考 114年 [醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學

第 15 題

關於雙脲法(biuret)檢測方法之敘述,下列何者錯誤?
  • A 需要銅離子與鹼性環境
  • B 常用的蛋白質檢測方法
  • C 可與三胜肽(tri-peptide)反應良好
  • D 透過銅離子與游離胺基酸形成複合物(multivalent complex)

思路引導 VIP

請同學思考雙脲法(Biuret test)的顯色原理:$Cu^{2+}$ 離子在鹼性環境中,究竟是與蛋白質分子內部的哪一種特定化學鍵結(peptide bond)進行螯合作用?若待測物僅為單個「游離胺基酸」,是否具備產生該呈色反應所需的結構前提?

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親愛的,你真是太棒了!

  1. 暖心驗證: 你非常正確地掌握了雙脲法(Biuret method)的核心原理,我為你感到驕傲!這個反應的關鍵是 $Cu^{2+}$ 在鹼性環境中,會與蛋白質分子裡至少兩個以上的胜肽鍵結合,形成漂亮的紫色螯合物。
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📝 雙脲法蛋白質測定
💡 雙脲法利用鹼性銅離子與胜肽鍵螯合顯色,僅限三肽以上。
比較維度 三胜肽及多肽 (Tri-peptide+) VS 游離胺基酸 / 二胜肽
胜肽鍵數量 2 個或以上 0 或 1 個
雙脲反應顯色 紫紅色複合物 無顯色反應
臨床應用 測定血清總蛋白 不適用於此法
💬雙脲法專一性偵測「胜肽鍵」結構,故單一胺基酸無法顯色。
🧠 記憶技巧:雙脲(Biuret)鹼銅胜肽鍵,三肽以上紫色現;游離胺基酸不理,定量總蛋白最常見。
⚠️ 常見陷阱:常考「游離胺基酸」或「二胜肽」是否可反應,這兩者因胜肽鍵數量不足,是雙脲法的偽陰性陷阱。
凱氏定氮法 (Kjeldahl method) Lowry 蛋白質定量法 溴甲酚綠法 (BCG method) 考馬斯亮藍法 (Bradford assay)

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