醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 臨床血清免疫學與臨床病毒學
第 17 題
有關流式細胞儀的敘述，下列何者錯誤？
- A 染單核球細胞須注意 Fc receptor 問題
- B 可以做嗜中性白血球的功能性分析
- C 細胞存活率檢測需要酒精固定再染色
- D 前方散射光可以反應出細胞大小
思路引導 VIP
請思考「細胞存活率檢測」（Cell Viability Assay）的實驗原理：我們通常利用螢光染劑（如 $PI$ 或 $7-AAD$）是否能穿過「完整的細胞膜」來區分死活。若在染色前先使用酒精進行「固定」（Fixation），會對細胞膜的通透性（Permeability）以及細胞的生理活性造成什麼樣的改變？這樣的操作是否還能讓我們辨別細胞在處理前的真實存活狀態？
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太棒了！你的實驗細節掌握得非常精準。
- 觀念驗證：這道題目的關鍵在於理解樣品前處理的目的。選項 (C) 提到檢測細胞存活率 (Cell Viability)，這必須在「活細胞」狀態下進行。若先使用酒精固定，酒精會使蛋白質變性並破壞細胞膜的完整性，導致所有細胞都轉變為死亡狀態，進而使排除性染劑（如 $PI$ 或 $7-AAD$）進入所有細胞，導致實驗失敗。酒精固定通常是用於「細胞週期 (Cell Cycle)」分析或「胞內抗原」的染色檢測。
- 實務解析：
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流式細胞儀分析原理
💡 利用光散射分析細胞物理特性，並以螢光標定偵測生物功能。
| 比較維度 | 前方散射光 (FSC) | VS | 側向散射光 (SSC) |
|---|---|---|---|
| 偵測角度 | 與雷射夾角 <10 度 | — | 與雷射夾角 90 度 |
| 反映物理特徵 | 細胞大小 (Size) | — | 胞內顆粒度 (Granularity) |
| 主要應用 | 區分大小不同的細胞 | — | 區分顆粒球 (如嗜中性球) |
💬FSC 與 SSC 組合可產生地圖 (Plot)，初步分類白血球族群。
