第 五 題

看到本題，首先要辨識出這是關於分子生物學中 DNA 定序技術演進的考題。接著應該從第一代定序（Sanger法）的「鏈終止反應」切入，思考雙去氧核苷酸（ddNTP）缺乏 3'-OH 導致 DNA 聚合酶無法延伸的機制，以及隨後的毛細管電泳判讀。然後進一步思考次世代定序（NGS）的核心突破在於「大規模平行處理（Massively parallel）」，並回憶市面上三大主流 NGS 平台（如 Illumina、Ion Torrent、PacBio）各自利用了什麼特殊化學或物理原理來偵測鹼基的加入（如螢光可逆終止、氫離子pH變化、單分子即時偵測）。最後，總結 NGS 在通量、成本、速度及不需活體選殖等方面如何解決 Sanger 法的瓶頸。