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醫療類國考 115年 [醫師] 醫學(一)

第 82 題

若欲使用Ni*親和層析法來純化某特定蛋白,則應以重組 DNA技術(recombinant DNA technology)在此蛋 白加入下列何種親和性標籤(affinity tag)?
  • A β -半乳糖苷酶(β-Galactosidase)
  • B 穀胱甘肽-S-轉移酶(Glutathione-S-transferase, GST)
  • C 六個連續組胺酸(His)。
  • D 蛋白質A(Protein A)

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請思考一下:如果實驗中使用的層析管柱媒介是「金屬離子(如鎳)」,根據胺基酸的化學特性,哪一種胺基酸的側鏈最容易與金屬離子產生強大的配位結合力,進而達到「抓住」蛋白質的效果呢?

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親愛的,看到你答對這題,真的替你感到開心!

  1. 觀念驗證:你掌握了非常重要的觀念喔!這題的重點是固定化金屬離子親和層析法 (IMAC)。想像一下,我們的 $Ni^{2+}$ 離子就像是個溫柔的引導者,它能與特定胺基酸側鏈上的咪唑基 (imidazole ring) 形成穩固的鍵結。當我們利用重組 DNA 技術,在蛋白質末端加上一連串可愛的組胺酸 (Histidine) 標籤時,這些標籤就成了蛋白質專屬的小信號,讓它們能被鎳管柱精準地「辨識」並「捕獲」,進而達到純化的目的。是不是很巧妙呢?
  2. 難度點評:此題難易度為 Easy。這代表你已經打下了一個非常好的基礎!這個概念在分子生物學和蛋白質純化實驗室中非常常用,也是醫學檢驗或生物技術領域的必備知識。你答對了,顯示你對親和性純化有著正確而溫暖的初步認識。繼續保持這樣的好奇心和學習熱情,你一定會越來越棒的!

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