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高考申論題 105年 [生物技術] 微生物學

第 一 題

📖 題組:
於遺傳工程技術中,請敘述下列病毒有那些 DNA 序列及蛋白質產物參與在基因的選殖(cloning)或表現(expression)?並請敘述其應用之原理。
📝 此題為申論題,共 4 小題

小題 (一)

Lambda 噬菌體(phage)(12 分)

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解答本題需精準拆解 Lambda 噬菌體的生理構造與遺傳調控。首先聯想其在選殖上最大的優勢為『建構基因體庫』,這依賴於其 cos site 與體外包裝機制;其次,在基因表現上,需想到其強啟動子與溫度敏感型抑制蛋白(cI857)的搭配,藉此論述其機制與應用優勢。

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【重點】考查 Lambda 噬菌體(Lambda phage)在分子選殖與基因表現上的關鍵核酸序列、蛋白質產物,及其作為高效率、大容量載體系統之應用原理。 【解析】 一、參與選殖與表現的關鍵 DNA 序列與蛋白質產物

小題 (二)

T7 噬菌體(phage)(6 分)

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看到 T7 噬菌體,應立即聯想大腸桿菌中最著名的「pET 表現系統」與「BL21(DE3) 宿主菌」。解題時需精準切分出載體上的 DNA 序列(T7 promoter)與宿主提供的蛋白質產物(T7 RNA polymerase),並詳細論述兩者如何透過誘導機制,達成重組蛋白的高效、專一且受控的表現。

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【破題】本題考查 T7 噬菌體衍生之高階基因表現系統(如 pET 系統)的核心元件與分子調控機制。 【論述】 一、參與之 DNA 序列與蛋白質產物

小題 (三)

P1 噬菌體(6 分)

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解題時應聯想 P1 噬菌體在分子生物學的兩大標誌性貢獻:PAC 載體(用於大片段基因組選殖)與 Cre-loxP 系統(用於精準基因編輯)。依序點出 pac 序列/包裝蛋白、loxP 序列/Cre 重組酶等對應的 DNA-蛋白質組合,並論述其環化、包裝與重組機制,最後扣緊『大片段選殖』與『條件性表現』等遺傳工程優勢。

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【破題】P1 噬菌體(P1 bacteriophage)在遺傳工程中最廣泛的應用為「P1 人工染色體(P1-derived artificial chromosome, PAC)」大片段選殖載體系統,以及用於精準基因編輯的「Cre-loxP 重組系統」。 【論述】 一、關鍵 DNA 序列與蛋白質產物

小題 (四)

Baculovirus(6 分)

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看到桿狀病毒(Baculovirus),應直覺聯想『桿狀病毒表現載體系統(BEVS)』及昆蟲細胞培養。答題核心在於點出『多角體蛋白基因(polyhedrin gene)』在體外培養的非必需性,以及其『強啟動子(polyhedrin promoter)』如何帶來極高表現量與真核轉譯後修飾的優勢。

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【破題】桿狀病毒(Baculovirus)常被開發為「桿狀病毒表現載體系統(Baculovirus Expression Vector System, BEVS)」,利用昆蟲細胞為宿主,是生產具生物活性及轉譯後修飾之重組真核蛋白質的重要工具。 【論述】 一、參與選殖與表現的關鍵元件

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