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普考申論題 106年 [衛生技術] 生物技術學概要

第 四 題

四、請敘述高通量定序平台與桑格定序法(Sanger Sequencing)的原理及比較。(20 分)
📝 此題為申論題

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本題測驗考生對跨世代DNA定序技術的掌握度。作答時應先分別精確闡述桑格定序(連鎖終止法)與高通量定序(次世代定序,大規模平行定序)的核心反應機制,最後務必以「比較表」呈現兩者在通量、讀長、成本及應用上的差異,以符合評分標準與閱卷期待。

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【破題】 定序技術是現代分子生物學的核心。第一代定序以桑格定序法(Sanger Sequencing)為代表,奠定了基因體學的基礎;而高通量定序平台(High-Throughput Sequencing, HTS,常指次世代定序 NGS)則以其大規模平行定序能力,徹底改變了生物醫學與臨床診斷的發展。 【論述】

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📝 定序技術比較
💡 比較第一代桑格定序與次世代定序之原理、通量及實務應用。
比較維度 桑格定序法 (Sanger) VS 高通量定序 (HTS/NGS)
核心原理 雙去氧鏈終止法 大規模平行定序
測序通量 低(單次單一片段) 極高(百萬級片段)
讀取長度 較長 (700-1000bp) 較短 (50-300bp)
單位成本 極高 極低
臨床地位 驗證用黃金標準 大規模篩檢與研究
💬桑格法定序精準但通量低,NGS 雖讀長較短但能進行大規模全基因體分析。
🧠 記憶技巧:桑格單一長準確(黃金標準),NGS 大量短低價(平行處理)。
⚠️ 常見陷阱:易誤認 NGS 的讀取長度優於桑格法;或混淆 ddNTP 與 NGS 可逆性終止基團的作法。
第三代定序技術 生物資訊學數據分析 橋式聚合酶連鎖反應

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