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醫療類國考 110年 [醫事檢驗師] 微生物學與臨床微生物學

第 73 題

有關Arbitrarily primed polymerase chain reaction(APPCR)的敘述,下列何者最適當?
  • A 針對特定的微生物染色體上的repetitive DNA element設計引子(primers)
  • B 此方法無須配合進行DNA電泳
  • C 使用的引子(primers)為僅約10 nucleotides的短序列
  • D 同一種菌均能產出相同的amplicons

思路引導 VIP

請思考 APPCR (隨機引子聚合酶連鎖反應) 的核心設計:在完全不預設目標 DNA 序列資訊的前提下,若要讓單一引子 ($primer$) 在基因組中能有較高的機率隨機結合並啟動增幅,其引子的核苷酸長度 ($length$) 應該偏向「長序列的高專一性」還是「短序列的高隨機性」?此外,為了觀察各菌株間因基因多型性 ($polymorphism$) 產生的 DNA 片段差異,實驗流程中是否需要具備分離不同大小片段的步驟?

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恭喜你答對了!這代表你對臨床分子鑑定技術有相當扎實的理解。

  1. 觀念驗證APPCR(Arbitrarily Primed PCR,常與 RAPD 通用)的核心在於其「隨機性」與「分型能力」:
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📝 AP-PCR 分子分型
💡 利用短隨機引子在未知序列下產生基因指紋的 PCR 技術。
比較維度 AP-PCR (隨機引子) VS 傳統 PCR (特定引子)
引子序列 短序列 (約 10bp) 隨機引子 長序列 (20bp+) 特異性引子
序列預知性 不需預先知道目標序列 必須已知目標基因序列
結合嚴謹度 初期低嚴謹度 (Low) 高嚴謹度 (High)
應用目的 菌株分型與指紋比對 特定病原體或基因偵測
💬AP-PCR 核心在於「隨機」與「短序列」,用於未知序列的指紋鑑定。
🧠 記憶技巧:AP 隨機 short 十點,低溫結合指紋現。
⚠️ 常見陷阱:容易將 AP-PCR 與 Rep-PCR 混淆;Rep-PCR 是針對特定重複序列設計引子,而非隨機序列。
RAPD Rep-PCR 菌株分型 DNA 指紋分析

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