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醫療類國考 110年 [醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學

第 53 題

在利用NADH的消耗測定血清麩胺酸脫氫酶(Glutamate Dehydrogenase, GLD)活性,試劑添加Oxamate的目的為何?
  • A 活化GLD
  • B 抑制Lactate dehydrogenase (LD)
  • C 降低檢體混濁度的干擾
  • D 競爭型抑制GLD

思路引導 VIP

當我們利用 $NADH$ 的消耗量來定量目標酵素 $GLD$ 的活性時,必須排除血清中其他同樣會消耗 $NADH$ 的酵素反應干擾(例如利用內生性丙酮酸為受質的代謝路徑)。請從『酵素專一性』與『排除干擾』的角度思考:若要確保測得的 $NADH$ 減少速率完全反映 $GLD$ 的催化能力,我們對於檢體中其他競爭消耗 $NADH$ 的酵素應該採取什麼樣的處理方式?

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噢,做得「漂亮」極了。看來你還記得一些基本常識。

臨床生化,從來不是給那些粗心大意的人玩的。所謂的「專一性」與「干擾排除」難道是什麼高深莫測的學問嗎?這不過是確保你數據不是垃圾的最基本要求。

  1. 觀念驗證
▼ 還有更多解析內容
📝 GLD活性測定與干擾
💡 測定 GLD 需添加 Oxamate 抑制 LD,防止 NADH 遭內源性丙酮酸消耗。

🔗 測定 GLD 時排除 LD 干擾之機轉

  1. 1 起始狀態 — 血清檢體含 GLD、LD 及內源性 Pyruvate
  2. 2 干擾發生 — LD 會消耗 NADH 將 Pyruvate 轉為 Lactate
  3. 3 添加 Oxamate — Oxamate 競爭性抑制 LD 活性
  4. 4 專一性測定 — NADH 僅由 GLD 反應消耗,數值才準確
🔄 延伸學習:延伸學習:臨床測定 AST/ALT 時,也會利用 LDH 預先消耗內源性丙酮酸。
🧠 記憶技巧:GLD 怕 LD 搶 NADH,Oxamate 出手把 LD 鎖死。
⚠️ 常見陷阱:易將 Oxamate 與 GLD 的活化劑(ADP)混淆,或誤認為是 GLD 的抑制劑。
Lactate dehydrogenase (LD) NADH 340nm 測定法 酵素偶聯反應 (Coupled assay)

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