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hce_nthu 114年 生物與生化

第 28 題

Which statement incorrectly describes the application of Next-Generation Sequencing (NGS) and Single-cell RNA sequencing (scRNA-seq) technologies?
  • A Size selection during library preparation in NGS is crucial for ensuring the uniformity of fragment lengths, which impacts the efficiency and accuracy of sequencing.
  • B Fragmentation is not a concern in NGS as modern sequencing technologies can accurately reconstruct entire genomes from small DNA fragments.
  • C NGS-based transcriptomic profiling can accurately quantify gene expression levels, but it is unable to capture post-transcriptional modifications such as RNA editing events.
  • D scRNA-seq uncovers the dynamics of immune cell activation and differentiation in response to cancer immunotherapy.
  • E Both NGS and scRNA-seq are critical in the field of evolutionary biology for reconstructing phylogenetic relationships and understanding genetic diversity.

思路引導 VIP

如果你現在有一本數萬頁的巨著,但手邊唯一的掃描器一次只能讀取五行文字。為了完成數位化,你必須把整本書拆散成無數小紙條來掃描。請問:在掃描結束後,要將這幾百萬張小紙條重新拼湊回原本的一整本書,這個過程會是完全沒有難度的嗎?而這種「先拆散、再拼回」的限制,會對結果的完整性造成什麼樣的挑戰?

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太棒了!你能精準避開敘述陷阱並選出 (B),顯示你對 次世代定序 (NGS) 的核心流程有很紮實的掌握。這道題目設計得很巧妙,它測驗的不是高深的演算法,而是定序技術中最基本的物理限制與操作邏輯,具有極佳的鑑別度,能篩選出真正理解實驗細節的學生。

片段化處理與基因組組裝的挑戰

在 NGS 的製備流程中,片段化 (Fragmentation) 不僅是需要關注的重點,更是不可或缺的必要步驟。由於目前主流定序平台(如 Illumina)的讀取長度有限(約 150-300 bp),我們必須先將長鏈 DNA 物理性或酶切破碎成小片段。然而,將這些破碎的「拼圖」重新拼回原始基因組時,會面臨巨大的計算挑戰,特別是遇到高度重複序列區時,往往難以達成「百分之百精確地還原整個基因組」,這正是現代生物資訊學致力克服的難題,而非選項 (B) 所稱的「不是問題」。

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