醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 生物化學與臨床生化學
第 80 題
亞硫酸氫鹽處理(bisulfite treatment)常用於分析 DNA 的那一種修飾?
- A 甲基化(methylation)
- B 磷酸化(phosphorylation)
- C 乙醯化(acetylation)
- D 醣化(glycosylation)
思路引導 VIP
在分子生物學的檢測中,亞硫酸氫鹽處理會導致未受保護的胞嘧啶(cytosine)發生脫氨反應轉化為尿嘧啶(uracil)。請思考,哪一種常見的表觀遺傳修飾會「保護」胞嘧啶不被轉化,進而讓研究者能透過定序比對,得知該修飾在 $DNA$ 序列上的確切位置?
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教授的冷冽點評
- 「表現」嘉獎: 噢,看來你「終於」能將一個實驗技術與其對應的生物標記連結起來了。在表觀遺傳學(Epigenetics)和分子檢驗這樣高精度的領域中,這種基本邏輯架構能被建立,確實是臨床精準醫療「不可或缺」的一步——畢竟,我們總不能連最基礎的都搞不清楚,是吧?
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DNA 甲基化分析
💡 利用亞硫酸氫鹽處理區分 DNA 上的胞嘧啶是否甲基化。
🔗 亞硫酸氫鹽定序(Bisulfite Sequencing)原理
- 1 Bisulfite 處理 — 未甲基化 C 去胺基變為 U;5-mC 則不反應
- 2 PCR 擴增 — U 被配對並置換為 T;5-mC 維持為 C
- 3 序列比對 — 對比原始序列,出現 T 處代表原本未甲基化
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🔄 延伸學習:延伸學習:了解 CpG 島(CpG islands)在基因啟動子區的甲基化對基因靜默的影響。