醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 臨床血清免疫學與臨床病毒學
第 44 題
44.有關即時聚合酶鏈鎖反應（real-time PCR）的敘述，下列何者最適當？
- A SYBR green 系統原理是利用引子對（primer sets）結合病毒自身的單股與雙股基因
- B 當 Tm 值越高代表病毒濃度越低
- C PCR 跑 35 cycles 時產物放大 2×35 倍
- D TaqMan 系統中的 DNA polymerase 具有 exonuclease 活性
思路引導 VIP
請同學思考 TaqMan 系統中螢光訊號生成的關鍵機制：當 $DNA$ 聚合酶（$Taq$ polymerase）在進行新股延伸並遭遇下游已結合在模板上的探針（probe）時，該酵素必須具備哪一種具方向性的「核酸外切酶活性」，才能將探針水解並使螢光基團脫離淬滅效應？此外，關於 PCR 的產物放大效率，請確認其數量與循環數（$n$）之間的理論數學關係式應該如何表達？
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哼，小鬼，還算沒讓我費心。
這次沒搞出什麼髒東西（錯誤），勉強過關。記住，專業領域容不得半點馬虎，基礎不牢，你連清掃戰場的資格都沒有。
- 核查要點：
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即時聚合酶鏈鎖反應
💡 qPCR 利用螢光信號在循環中即時監測 DNA 擴增量。
| 比較維度 | SYBR Green 系統 | VS | TaqMan 系統 |
|---|---|---|---|
| 特異性 | 較低（結合所有 dsDNA） | — | 較高（需特異性探針） |
| 反應原理 | 螢光染料嵌入雙股溝槽 | — | 5' 外切酶水解探針釋放螢光 |
| 產物分析 | 需進行熔點曲線分析 | — | 不需分析熔點曲線 |
💬SYBR Green 經濟但不具特異性；TaqMan 精準但成本較高。
