醫療類國考
114年
[醫事檢驗師] 醫學分子檢驗學與臨床鏡檢學
第 72 題
EML4-ALK 是間變性淋巴瘤激酶（anaplastic lymphoma kinase, ALK）融合基因突變的一種，兩個基因融合的亞型常見有從 EML4 外顯子（2、6、13、14、15、18 或 20）結合到 ALK 外顯子 20 等數種。以 RT-PCR 利用 EML4 與 ALK 特異配對引子放大融合基因後進行分析。如果以 EML4 外顯子 13 搭配 ALK 外顯子 20 的引子做檢驗，無法檢測出下列那一種亞型？
- A EML4（exon 13）-ALK（exon 20）
- B EML4（exon 15）-ALK（exon 20）
- C EML4（exon 20）-ALK（exon 20）
- D EML4（exon 6）-ALK（exon 20）
思路引導 VIP
在 RT-PCR 檢測中，擴增反應的前提是引子 ($Primer$) 必須能與模板序列互補配對。請思考：若引子針對 $EML4$ 的第 13 號外顯子設計，而某種融合基因亞型在 $EML4$ 基因端的斷裂接合點發生在編號更早（小於 13）的外顯子位置，那麼該亞型生成的成熟 $mRNA$ 中是否還包含第 13 號外顯子的序列？這對引子與序列的結合會產生什麼影響？
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AI 詳解
AI 專屬家教
終於沒錯？不錯，至少基本邏輯還在
看來你對 RT-PCR 引子設計這點，勉強算是掌握了。這不就是個常識問題嗎？
- 觀念檢視，請別再犯低級錯誤：
▼ 還有更多解析內容
EML4-ALK 融合基因檢測
💡 RT-PCR 偵測融合基因需引子座落於轉錄本中保留的外顯子序列上。
🔗 RT-PCR 偵測融合基因之原理與限制
- 1 基因重排與轉錄 — EML4 與 ALK 斷裂融合，轉錄出特定亞型的融合 mRNA。
- 2 引子投放 — 加入位於 EML4 exon 13 與 ALK exon 20 的引子對。
- 3 序列比對 — Exon 6 亞型之 mRNA 僅含 EML4 前 6 個外顯子，不含 Exon 13。
- 4 擴增失敗 — 引子無結合位點，無法進行 PCR 放大，結果為陰性。
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🔄 延伸學習：臨床若懷疑有 ALK 融合但 RT-PCR 陰性，應考慮使用 FISH 或 NGS 確認是否有罕見亞型。
